微生物检验师考点
2、（正常菌群）条件致病性微生物——临床上多引起内源性感染。
3、G+菌特有成分：磷壁酸（重要表面抗原，可用于细菌血清学分型）（外毒素）
4、G-菌特有成分：外膜层（由脂多糖（内毒素）、脂质双层（磷脂）、脂蛋白）
5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥（G-菌无。是溶菌酶、青霉素作用部位）
6、细菌的主要遗传物质：核质（染色体）、质粒（存在于胞质，双链闭合环状DNA分子）、转位因子
7、细菌特殊结构：荚膜（保护，致病，抗原性，鉴别）、芽胞、鞭毛（运动器官）、菌毛（普通菌毛—粘附，致病性；性菌毛—接合方式转移遗传物质）
*将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标
8、L型（细胞壁缺陷）菌落：①“油煎蛋”（荷包蛋）样菌落（典型L型细菌）。②颗粒型菌落（简称G型菌落）③丝状菌落（简称F型菌落）。高渗环境生长。（环丙沙星）
9、自营菌：以无机物为原料；异营菌(腐生菌：以无生命的有机物质为营养物质；寄生菌：以宿主体内有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。
10、细菌营养物质：水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。
11、细菌个体的生长繁殖方式：无性二分裂，在对数期以几何级数增长
12、细菌分类（伯杰）等级依次为界、门、纲、目、科、属、种（最小分类单位）。
13、常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法；
14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5%～10%CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24～48h生长良好。
15、血清学诊断时，一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2～3份检查，抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。
16、透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构；扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附件的观察。
17、细菌染色的基本程序：涂片（干燥）→固定→初染→染色（媒染）→（脱色）→（复染，使脱色菌体着色）。
18、胃部细菌喜酸，肠道细菌喜碱
19、SS琼脂有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。因选择性过强，可影响检出率，所以，使用时最好加一种弱选择平板以配对互补。
20、碱性琼脂或TCBS琼脂用于从粪便中分离霍乱弧菌及其他弧菌。
21、痰标本：血平板、中国蓝／麦康凯、巧克力平板作分离。
22、中国蓝／麦康凯用于筛选G-杆菌；
23、含杆菌肽的巧克力平板（含有V和X因子）用于筛选嗜血杆菌
24、连续划线分离法：杂菌不多的标本。
分区划线分离法：杂菌量较多的标本。
25、斜面接种法：该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性
26、倾注平板法：牛乳、饮水和尿液细菌计数
27、涂布接种法：常用于纸片法药物敏感性测定，也可用于被检标本中的细菌计数。
28、半固体培养基用于观察细菌的动力（沿穿刺线生长呈模糊或根须状，并使培养基变混浊为动力阳性）
29、α溶血：菌落周围血培养基变为绿色环状；红细胞外形完整无缺。
β溶血：红细胞的溶解在菌落周围形成一个完全清晰透明的环。
γ溶血：无溶血。
双环：在菌落周围完全溶解的晕圈外有一个部分溶血的第二圆圈。
30、氧化-发酵试验（O/F试验）：有氧参加——氧化型；无氧降解——发酵型；不分解葡萄糖而分解蛋白胨——产碱型。（肠杆菌科细菌发酵型全+）
31、甲基红试验(与V-P试验相反)：阳性红色，阴性黄色。大肠埃希菌（+），产气肠杆菌(-)
32、白喉棒状杆菌：G+，异染颗粒、毒力试验，Elek（吕氏）平板，亚碲酸钾血琼脂。外毒素（毒血症）只有携带β-棒状噬菌体的溶原性白喉杆菌才能产生外毒素。
33、内毒素测定主要用于确诊患者是否发生G-细菌感染。常采用鲎试验。本方法灵敏度高，可检查出0.～0.μg/ml内毒素。
外毒素主要用于确诊患者是否感染革兰阳性菌及部分阴性菌。常用体内及体外毒力试验检测，也可通过ELISA法测定。
34、葡萄球菌属：G+，耐热、耐干燥、耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。
凝固酶阳性葡萄球菌：金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和家畜葡萄球菌
凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）：表皮葡萄球菌（新生霉素敏感，医院感染，血培养污染）、腐生葡萄球菌（新生霉素耐药，凝固酶阴性。尿路感染）
蛋白抗原：葡萄球菌A蛋白（SPA）：完全抗原，有种属特异性，无型特异性。抗吞噬作用。多糖抗原：半抗原，型特异性。
35、金黄色葡萄球菌：触酶试验、凝固酶试验（最简单）、耐热DNA酶试验、甘露醇发酵试验均阳性。对新生霉素敏感。透明溶血环。
致病性：感染（化脓性感染，食物中毒，表现为急性胃肠炎），医院内感染，毒素性疾病。主要致病物质有血浆凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素、肠毒素、表皮溶解毒素和毒性休克综合征毒素等。
耐药性检测：检耐甲氧西林金葡菌（MRSA），耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌（MRSE），耐万古霉素金葡菌（VRSA），耐万古霉素表皮葡萄球菌（VRSE）。NCCLS/CLSI推荐用头孢西丁纸片法检测mecA基因介导对苯唑西林耐药的葡萄球菌。
36、链球菌属：G+球菌，触酶阴性。在液体培养基中生长时易形成长链而表现为沉淀生长。5%CO2环境。抵抗力不强，对各种常用消毒剂敏感，60℃加热30分钟即可杀灭。
A群链球菌（猩红热）——杆菌肽敏感；B群链球菌（败血症、肺炎、脑膜炎、咽喉炎）——CAMP试验阳性（与金葡菌，箭头状溶血），水解马尿酸；D群链球菌——七叶苷试验阳性（40%胆汁培养基，变黑）；
甲型（α）溶血性链球菌：菌落呈灰色针尖状，菌落周围有1～2mm宽的草绿色溶血环，故又称草绿色链球菌。本菌为条件致病菌。
乙型（β）溶血性链球菌：通称溶血性链球菌，菌落较小，灰白色，菌落周围有2～4mm宽的透明溶血环。该型细菌致病性最强，常引起人和动物多种疾病。
丙型（γ）链球菌：呈灰白色细小菌落，在菌落周围无溶血环。一般无致病性。
致病物质：链球菌溶血素、致热外毒素、透明质酸酶、链激酶、链道酶及M蛋白等。人类链球菌感染中85%以上由A群链球菌引起，对青霉素G高度敏感
化脓型链球菌：杆菌肽敏感试验阳性。
***肺炎链球菌：混浊生长，有荚膜（荚膜肿胀试验：阳性），大叶性肺炎。
分解菊糖、胆汁溶解试验阳性、Optochin敏感试验阳性——与草绿色链球菌鉴别。
37、肠球菌属：G+，触酶试验阴性，与同科链球菌的显著区别在于肠球菌能在高盐（6.5%NaCl）、高碱（pH9.6）、40%胆汁培养基上和10～45℃环境下生长，并对许多抗菌药物表现为固有耐药。医院感染病原菌，常引起尿路感染，医院感染，
38、奈瑟菌属：G-双球菌，无鞭毛，无芽胞，有菌毛。专性需氧，氧化酶阳性。
脑膜炎奈瑟菌：流行性脑脊髓膜炎（简称流脑），空气传播，对人致病的主要是A群。氧化酶、触酶试验阳性；分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气。
39、淋病奈瑟菌：不酵解麦芽糖与蔗糖、30%H试验阳性（与脑膜炎奈瑟菌鉴别）、
40、卡他莫拉菌：社区呼吸道感染的主要病原体之一
41、肠杆菌科：均为G-杆菌。均不形成芽胞。多数有周鞭毛（运动），少数菌属细菌可形成荚膜。发酵葡萄糖产酸、产气，触酶阳性。(鉴别肠道致病菌和非致病菌常选用乳糖发酵试验)
*菌体（O）抗原，鞭毛（H）抗原和表面抗原（如Vi抗原、K抗原）少数菌属如志贺菌属和克雷伯菌属无鞭毛，无运动能力。
42、大肠埃希菌：俗称大肠杆菌，肠道正常菌群。泌尿系统感染。超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的主要产酶株。尿素酶试验阴性，吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验（IMViC）＋＋－－，
克氏双糖铁琼脂（KIA）上斜面和底层均产酸产气，H2S阴性，动力、吲哚、尿素（MIU）＋＋－。硝酸盐还原、动力多数阳性。
**引起肠道感染的大肠埃希菌有下列五个病原群。
（1）肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）：引起霍乱样肠毒素腹泻（水泻）。
（2）肠致病性大肠埃希菌（EPEC）：主要引起婴儿腹泻。
（3）肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）：可侵入结肠黏膜上皮，引起痢疾样腹泻（黏液脓血便）。
（4）肠出血性大肠埃希菌（EHEC）：又称产志贺样毒素（VT）大肠埃希氏菌（SLTEC或UTEC），其中O:H7（常规检测项目）可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征（HUS）。临床特征为严重的腹痛、痉挛，反复出血性腹泻，伴发热、呕吐等。严重者可发展为急性肾衰竭。
（5）肠黏附性大肠埃希菌（EAggEC）：腹泻
*与志贺菌相鉴别：醋酸钠和葡萄糖铵利用试验及粘质酸盐产酸三种试验。大肠埃希菌均为阳性，而志贺菌均为阴性。
43、志贺菌属：痢疾杆菌（细菌性痢疾）。我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢最常见。强选择鉴别培养基——沙门、志贺菌选择培养基（SS）；弱选择培养基——麦康凯或中国蓝培养基。
MIU：一、＋／一、一；IMViC：－、＋、－、－
分解葡萄糖产酸不产气，不分解乳糖（宋内志贺菌可迟缓分解乳糖），MR试验阳性，只有O抗原而无鞭毛抗原，
A群痢疾志贺菌，甘露醇阴性，10个血清型。B群福氏志贺菌，有6个血清型和X、Y2个变种。C群鲍特志贺菌，15个血清型。D群宋内志贺菌，仅有一个血清型，有光滑型（S）和粗糙型（R）两种菌落。
*与大肠埃希菌的鉴别
（1）无动力，不发酵乳糖，靛基质阴性，赖氨酸阴性；
（2）发酵糖产酸不产气（福氏志贺菌6型、鲍氏志贺菌13和14型、痢疾志贺菌3型除外）；
（3）分解黏液酸，在醋酸盐和枸橼酸盐琼脂上产碱。
*与伤寒沙门菌鉴别：硫化氢和动力阳性（伤寒）
致病因素为侵袭力、内毒素及外毒素
44、沙门菌属：无芽胞，无荚膜的革兰阴性直杆菌。有周身鞭毛（除鸡沙门菌外），能运动，多数有菌毛。
KIA：K／A（K碱性，A酸性；葡萄糖发酵，乳糖不发酵）、产气＋／一、H2S＋／一，MIU：＋、一、＋，触酶＋，硝酸盐还原＋。肥达试验。
S～R变异（光滑变粗糙，生理盐水中自凝）；H～O变异（失去鞭毛）；相位变异（双相变单相）；V～W变异（失去Vi抗原）。
肠热症（伤寒与副伤寒病，慢性发热症状）。第1、2周采血液，第2、3周采粪便与尿液。整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。）
45、变形杆菌属：迁徙生长。具有尿素酶，可以水解尿素，产生氨。硫化氢、明胶液化和脂酶（玉米油）均阳性。分解葡萄糖产酸产气，乳糖不分解，动力（＋）。
抑制变形杆菌属菌的迁徙生长，可于血琼脂中加入苯酚（1g／L）或苯乙醇（0.25%）
普通变形杆菌：靛基质和麦芽糖均阳性，鸟氨酸脱羧酶阴性；奇异变形杆菌相反。
外-斐反应：普通变形杆菌OX19、OX2、0Xk的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原，是用以诊断某些立克次体病的依据。
46、鼠疫耶尔森菌：鼠疫。两极浓染。“钟乳石”状。28～30℃。KIA结果利用葡萄糖，不利用乳糖，不产H2S，MIU：-、-、-，丙氨酸脱氨酶试验呈阴性反应即可初步鉴定。甲紫亚硫酸钠琼脂。
47、小肠结肠炎耶尔森菌：翻滚旋转状运动。VP试验25℃阳性，37℃阴性，鸟氨酸脱羧酶阳性。MIU：+（22℃）、-、+
48、假结核耶尔森菌：两端浓染。25℃培养有周鞭毛，有动力，37℃培养无动力。
49、肺炎克雷伯菌：医院感染，有荚膜，G-杆菌。灰白色大而黏的菌落，长丝状。触酶阳性、脲酶阳性。动力和鸟氨酸脱羧酶均阴性是本菌的最大特点。易产超广谱β-内酰胺酶。对氨苄西林天然耐药。对产ESBLs菌株的治疗可用碳青酶烯类、β-内酰胺类抗生素／酶抑制剂或头霉菌素类进行治疗。
50、***肠杆菌属（阴沟肠杆菌、产气肠杆菌）有周鞭毛，能运动。IMVC：肠杆菌属多为－－＋＋；而大肠埃希菌是＋＋－－。
51、黏质沙雷菌：革兰阴性细小杆菌。沙雷菌具DNA酶和葡萄糖酸盐阳性（与其他菌属细菌的根本区别）
*爱德华菌属：IMVC为＋＋－－（与大肠埃希菌相同），但H2S阳性，甘露醇阴性。
52、弧菌科:G-杆菌。共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、发酵葡萄糖。
弧菌属极端鞭毛、甘露醇、脂酶、生长需要NaCl、对O敏感五项为＋＋＋＋＋
*霍乱弧菌（耐碱不耐酸，pH8.4～9.2时生长最好）——霍乱（米泔水样粪便）；副溶血性弧菌（无盐不生长，绿色菌落）——食物中毒（海产品）。
*不染色标本穿梭流星状运动（鱼群状）；O1群霍乱弧菌诊断血清，如果原运动活泼的现象停止（为制动试验阳性）
在碱性琼脂平板上——水滴状菌落。在TCBS（强选择）上——黄色菌落。在含亚碲酸钾（或庆大霉素）琼脂平板上——菌落中心呈灰褐色
氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。能产生靛基质，霍乱红反应（即亚硝基靛基质试验）阳性（非特异性）。
53、气单胞菌属：在65g/LNaCl中不生长。氧化酶试验阳性可与肠杆菌科细菌鉴别，发酵葡萄糖可与非发酵菌鉴别；
54、弯曲菌属细菌：革兰阴性菌。空肠弯曲菌、大肠弯曲菌在43℃生长，25℃不生长；胎儿弯曲菌在25℃生长，而43℃不生长；简明弯曲菌在25℃和43℃均不生长。空肠弯曲菌马尿酸水解试验阳性，是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一
55、幽门螺杆菌：G-菌，氧化酶、触酶试验、DNA酶均阳性，快速脲酶试验强阳性。在37℃能够生长，在25℃和42℃均不能生长，有动力。
56、厌氧菌：一类是革兰染色阳性有芽胞的厌氧芽胞梭菌（外毒素），另一类是无芽胞的革兰阳性及革兰阴性球菌与杆菌（正常菌群，条件致病性的内源性感染）。气-液相色谱分析
**有芽胞的厌氧菌只有梭菌属
*放线菌感染——硫黄样颗粒
常规血培养阴性的细菌心内膜炎、并发脓毒症血栓性静脉炎、伴有黄疸的菌血症等，应考虑可能有厌氧菌感染。
可能有厌氧菌感染
58、脆弱类杆菌引起败血症
59、炭疽芽胞杆菌：人畜共患病，是致病菌中最大的革兰阳性杆菌，竹节状。倒松树状。（皮毛—皮革厂）。串珠试验。
60、蜡样芽胞杆菌：表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状。干热℃经60分钟才能杀死。
61、产单核李斯特菌：20℃有动力，37℃动力缓慢，冷增菌（4℃）。伞状生长。通过胎盘或产道感染新生儿。本菌常伴随EB病毒引起传染性单核细胞增多症。
62、结核分枝杆菌：pH6.5～6.8。无内外毒素和侵袭性酶。人型结核分枝杆菌烟酸试验、硝酸盐还原和烟酰胺酶试验均为阳性，借此可与牛型结核分枝杆菌鉴别。Koch现象。Ⅳ型变态反应。罗氏培养基。
*在体内外经青霉素、环丝氨酸或溶菌酶诱导可影响细胞壁中肽聚糖的合成，异烟肼影响分枝菌酸的合成，巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌后溶菌酶的作用可破坏肽聚糖，均可导致其变为L型，呈颗粒状或丝状。
*卡介苗：毒力变异（减弱）保留抗原性。被动人工免疫。
63、麻风分枝杆菌：泡沫状，麻风细胞。
64、不发酵菌：不发酵或不分解糖类的G-无芽胞需氧杆菌。
***铜绿假单胞菌：绿脓杆菌。是医院感染的主要病原体之一。灰绿色或蓝绿色菌落，菌落周围有透明溶血环。对亚胺培南耐药主要原因之一是产生金属酶。
**不动杆菌属：生物学特征为“三阴”，即氧化酶、硝酸盐还原试验、动力阴性。鲍曼不动杆菌。
*产碱杆菌属：在含有蛋白胨的肉汤中产氨，可使pH上升至8.6。
*军团菌属：人工管道的水源中常存在此菌，如医院空调冷却水中常有此菌，对常用化学消毒剂敏感。活性炭-酵母浸出液琼脂。肺部感染。
65、流感嗜血杆菌：G-短小杆菌。加热血平板。（与金葡菌）卫星现象。脑膜炎。荚膜上的多糖抗原被称为M抗原。需要X因子、Ⅴ因子。
副流感嗜血杆菌：不需要Ⅹ因子。杜克嗜血杆菌本菌生长需要X因子，不需要Ⅴ因子。
66、杜克嗜血杆菌可引起软性下疳。
67、百日咳鲍特菌：鲍-金培养基
68、布鲁菌属：人畜共患病，菌血症，波浪热。首选多西环素。
69、衣原体：是一群体积较小，能通过细菌滤器，细胞内专性寄生，并有独特发育周期的原核细胞型微生物。鸡胚卵黄囊
原体：为成熟的衣原体。吉姆萨染色呈紫色，Macchiavello染色呈红色。在细胞外较为稳定，无繁殖能力，但有高度感染性。
始体（网状体）：吉姆萨染色和Macchiavello染色均呈蓝色。为衣原体发育周期中的繁殖型，代谢活泼，不能自胞外存活，无感染性。
*衣原体细胞壁LPS为属特异性补体结合抗原
**沙眼衣原体（2SP培养基。碘液染色阳性）：沙眼，非淋菌性泌尿生殖道感染（男性常见），性病淋巴肉芽肿。
*鹦鹉热衣原体：典型临床表现为非典型肺炎
70、克次体：是一类严格寄生在细胞内的原核细胞型微生物。菌体内同时含有DNA和RNA。
*普氏立克次体常以人的体虱为传播媒介，流行性斑疹伤寒（又称虱传斑疹伤寒）。流行性斑疹伤寒的外斐反应效价在1:时有诊断意义。
*莫氏立克次体（斑疹伤寒立克次体，外斐反应）的贮存宿主是鼠类，主要传播媒介是鼠蚤或鼠虱，地方性斑疹伤寒（又称鼠型斑疹伤寒）。
*恙虫病立克次体：通过恙螨幼虫叮咬传给人类，引起恙虫病。贝纳柯克斯体（又称Q热立克次体）引起Q热。
71、支原体：是一类无细胞壁、呈高度多形态性，能通过除菌滤器，在人工培养基上能生长繁殖的最小原核型微生物。革兰染色为阴性。无细胞壁仅有细胞膜是与细菌区别的主要特点。菌落呈“荷包蛋”样。
**肺炎支原体：酒瓶状。是人类原发性非典型性肺炎的主要病原体之一。补体结合试验（≥1:64～1:为阳性）（检测IgM抗体）
72、诺卡菌属：外源性感染。库欣综合征、糖尿病
73、螺旋体
*钩端螺旋体：Fontana镀银染色法染成深褐色。钩体病（人畜共患病及自然疫源性疾病）。发病1周内血液的阳性率高，1周后尿和脑脊液等的阳性率高。
**梅毒的临床病程分三期：
第一期为硬性下疳，极易传播感染，也适于涂片镜检。
第二期即梅毒疹期，全身皮肤黏膜出现皮疹，伴有淋巴结肿大，可累及骨、关节、眼及中枢神经系统。
第一、二期称早期梅毒，传染性强，破坏性较小。部分早期梅毒可进一步发展到第三期梅毒，即晚期梅毒。病损部位螺旋体少但破坏性大。严重者可出现心血管和中枢神经系统受损，可危及生命。后天性梅毒表现为反复隐伏发病和再发的特点。
74、噬菌体是病毒
75、流行性感冒病毒：正黏病毒科。血凝素（HA）、神经氨酸酶（NA），划分流感病毒亚型的依据。常用鸡胚接种培养，初次分离接种羊膜腔为最佳，传代适应后可移种尿囊腔。细胞培养一般用原代猴肾细胞（PMK）或犬肾传代细胞（MDCK）。不耐热，对干燥、日光、紫外线以及甲醛、乙醇等均敏感。
76、呼吸道合胞病毒：不能在鸡胚中增殖，引起婴幼儿下呼吸道疾病的最常见的病毒。最常见的传播途径是经飞沫传染，最易引起婴幼儿细支气管炎和细支气管肺炎
77、麻疹病毒：飞沫直接传播。麻疹疫苗，8月龄接种。
78、肠道病毒：属小RNA病毒科肠道病毒属。由粪-口途径传播。是人类最常见最重要的病毒。脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒
*轮状病毒：（秋季腹泻）婴幼儿急性腹泻的主要病因
79、流行性乙型脑炎病毒：可通过三带喙库蚊叮咬传播，引起流行性乙型脑炎，简称乙脑。猪为最重要的宿主和传染源。
80、登革病毒：登革热。埃及伊蚊和白纹伊蚊等传播
81、巨细胞病毒：猫头鹰眼特征
82、甲肝病毒：毛蚶
83、乙型肝炎病毒是DNA病毒，其他肝炎病毒均为RNA病毒。
84、HIV：gp、gp41
85、狂犬病病毒：嗜酸性包涵体（内基小体）。神经兴奋性增高，恐水病。
87、HPV：只能感染人的皮肤、黏膜的上皮细胞。尖锐湿疣主要由HPV-6引起
88、朊病毒（亚病毒，还包括类病毒、卫星病毒）就是蛋白质病毒，是只有蛋白质而没有核酸的病毒。中枢神经系统退化性病变
89、酵母型细胞和菌丝、孢子被染为革兰阳性（深紫色）。
**假丝酵母菌（俗称念珠菌）：出芽繁殖（芽生孢子）。芽管形成试验，假菌丝。沙保弱培养基。玉米粉培养基形成厚膜孢子。
**新型隐球菌：有荚膜，折光性强。印度墨汁作负染色。尿素酶试验阳性
*鉴定曲霉菌常用察氏琼脂
*卡氏肺孢菌病是AIDS最常见、最严重的机会感染性疾病。
*马尔尼菲青霉可引起马尔尼菲青霉病（感染）
90、扩散法（K-B法）：选择直径6.35mm，吸水量20μl的专用药敏纸片。
质控菌株采用标准菌株是进行质控的主要措施，应从可靠的菌种保藏中心索购，金黄色葡萄球菌ATCC，大肠埃希菌ATCC，铜绿假单胞菌ATCC及粪肠球菌ATCC或ATCC用于对试验结果进行监测。
琼脂稀释法是细菌药敏试验的金标准。释法所测得的某抗菌药物抑制待测菌生长的最低浓度为最低（或最小）抑菌浓度（MIC），稀释法也可测定最小杀菌浓度（MBC）。
91、细菌耐药的机制
1.产β-内酰胺酶是细菌对β-内酰胺类药物耐药的主要机制。
2.产生钝化酶如氨基糖苷类钝化酶、氯霉素乙酰转移酶等。
3.青霉素结合蛋白的改变如MRSA的耐药机制。
4.药敏作用靶位的改变如核糖体位点的改变引起大环内酯类、林可霉素耐药。
5.抗菌药物渗透障碍
92、消毒是去除或杀灭大多数微生物的过程。灭菌是去除或杀灭所有微生物的过程。
***注意：看到这里，微生物的要点已经总结完毕，以下内容供大家查阅之用。微生物检验中重要菌就那么几种，但是估计考试中不可能只从几种“明星”菌出题，所以感觉个个都重要，也因此微生物的要点总结耗时最长。希望大家除了看要点之外，还是多看书为好。***
碳水化合物的代谢试验
1.糖（醇、苷）类发酵试验：肠杆菌科细菌。
2.氧化-发酵试验（O/F试验）：肠杆菌科细菌（发酵型）与非发酵菌（氧化型或产碱型）的鉴别。
3.β-半乳糖苷酶试验（ONPG试验）：迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。
4.七叶苷水解试验：D群链球菌阳性，其他链球菌阴性。
5.甲基红试验：大肠埃希菌阳性；产气肠杆菌阴性。
6.V-P试验：与甲基红试验结果相反。
蛋白质和氧基酸的代谢试验
1.明胶液化试验：肠杆菌科细菌的鉴别，如沙雷菌、普通变形杆菌、奇异变形杆菌、阴沟杆菌等可液化明胶，而其他细菌很少液化明胶。
2.吲哚（靛基质）试验：肠杆菌科细菌的鉴定。
3.硫化氢试验：沙门菌属、爱德华菌属、亚利桑那菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属细菌，绝大多数硫化氢阳性，其他菌属阴性。
4.尿素分解试验：肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定。奇异变形杆菌和普通变形杆菌脲酶阳性，另外雷氏普罗威登菌和摩根菌为阳性，而斯氏和产碱普罗威登菌阴性。
5.苯丙氨酸脱氨酶试验：用于肠杆菌科细菌的鉴定。变形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属细菌均为阳性，肠杆菌科中其他细菌均为阴性。
6.氨基酸脱羧酶试验：用于肠杆菌科细菌的鉴定。如沙门菌属中除伤寒和鸡沙门菌外，其余沙门菌的赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶均为阳性。志贺菌属除宋内和鲍氏志贺菌外，其他志贺菌均为阴性。
碳源和氮源利用试验
1.枸橼酸盐利用试验：在肠杆菌科中埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌属和耶尔森菌属均为阴性，沙门菌属、克雷伯菌属通常为阳性。
2.丙二酸盐利用试验：克雷伯菌属为阳性，枸橼酸杆菌属、肠杆菌属和哈夫尼亚菌属中有些菌种也呈阳性，其他菌属均为阴性。
各种酶类试验
1.氧化酶试验：用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别，前者为阴性，后者为阳性。奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。
2.过氧化氢酶试验（触酶试验）：革兰阳性球菌中，葡萄球菌和微球菌均产生过氧化氢酶，而链球菌属为阴性，故此试验常用于革兰阳性球菌的初步分群。
3.硝酸盐还原试验：肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐；铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌等假单胞菌可产生氮气；有些厌氧菌如韦荣球菌等试验也为阳性。
4.脂酶试验：用于厌氧菌的鉴别。类杆菌属中的中间类杆菌产生脂酶，其他类杆菌则为阴性；芽胞梭菌属中产芽胞梭菌、肉毒梭菌和诺维梭菌也有此酶，而其他梭菌为阴性。
5.卵磷脂酶试验：主要用于厌氧菌的鉴定。产气荚膜梭菌、诺维梭菌产生此酶，其他梭菌为阴性。
6.DNA酶试验：在革兰阳性球菌中只有金黄色葡萄球菌产生DNA酶，在肠杆菌科中沙雷菌和变形杆菌产生此酶，故本试验可用于细菌的鉴别。
7.凝固酶试验：作为鉴定葡萄球菌致病性的重要指标。
8.CAMP试验：在链球菌中，只有B群链球菌CAMP试验阳性，故可作为特异性鉴定。
9.胆汁溶菌试验：用于肺炎链球菌与甲型链球菌的鉴别，前者为阳性，后者为阴性。
抑菌试验
1.0/抑菌试验：用于弧菌科的属间鉴别，弧菌属、邻单胞菌属对0/敏感，而气单胞菌属耐药。
2.杆菌肽试验：用于A群链球菌与非A群链球菌的鉴别。
3.奥普托欣（Optochin）试验：用于肺炎链球菌与其他链球菌的鉴别。
绪论
1.微生物的定义与特点;微生物的分类。
一、微生物的概念与特点
1.微生物（microorganism）??是一群个体微小，结构简单，肉眼不能直接看见，必须借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能观察到的微小生物的总称。
2.微生物的特点??
个体微小，结构简单
比表面积大，吸收多，转化快
繁殖快，代谢强
适应强，易变异
种类多，分布广???
1.微生物类型
根据微生物大小、结构和组成不同分为三类型2.病原微生物的定义病原微生物：是指能引起动物、植物或人类产生疾病的微生物。
3.医学微生物学的发展简史。
.微生物的发现与研究
（1）列文虎克发明显微镜，最早观察到微生物；微生物学研究的创始人：巴斯德、科赫、李斯特
第一章?细菌的基本性状
第一节?细菌的形态与结构
1.细菌细胞壁的结构和功能，肽聚糖结构及其化学组成；革兰阳性与革兰阴性细菌细胞壁的主要区别
（一）细胞壁
化学组成与结构，革兰染色共有组分：肽聚糖
特殊组分：G+?菌、G-菌不同
革兰阳性菌细胞壁特殊组分：磷壁酸
革兰阴性菌细胞壁特殊组分：外膜
革兰阴性菌细胞壁肽聚糖:聚糖骨架、四肽侧链
2.细胞壁的功能：
（1）维持细菌固有形态和抵抗低渗作用。（2）物质交换作用。（3）屏障作用。（4）免疫作用。（5）致病作用。（6）与细菌药物敏感性有关。?
G+菌与G-菌细胞壁结构比较
l细菌细胞膜的结构与真核细胞基本相同，由磷脂和多种蛋白质组成，但不含胆固醇。
l细菌细胞膜可形成一种特有的结构，称中介体。
2.细菌荚膜、鞭毛和菌毛的功能。
荚膜：
功能：
有抗吞噬和抵抗杀菌物质的杀菌作用，增强细菌的侵袭力，构成细菌致病力的重要因素之一。②具有免疫原性。③鉴别细菌和血清学分型
鞭毛：功能：细菌的运动器官
菌毛
普通菌毛：具有黏附性，与细菌致病性有关。
性菌毛：与细菌的遗传变异相关
3.芽胞结构特点、意义、与消毒灭菌的关系；细菌L型的形态特征、检验要点。
芽?胞：某些细菌（主要为革兰阳性杆菌）在一定条件下，细胞质浓缩脱水而形成一个折光性很强，具有多层膜状结构、通透性很低的圆形或卵圆形的小体。
L型细菌：细胞壁缺陷的细菌。
常发生在作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中。
根据细胞壁缺陷程度分：
原生质体（完全失去细胞壁，见于G+菌，仅在高渗环境中存活)
原生质球（细胞壁部分缺损，见于G-菌，在高渗或非高渗环境中均能存活）
4.G+菌和G-菌细胞壁结构的差异及其意义。
第二节?细菌的生理
细菌的生长条件,生长周期及各期的特点;IMViC试验的组成及机制;细菌分解及合成代谢产物的种类及意义。
细菌的生长繁殖
（一）细菌生长繁殖的条件
1.?充足的营养物质?包括：水、碳源、氮源、生长因子等。
2.?适宜的酸碱度???多为pH7.2～7.6。
3.?合适的温度???多数病原菌为35℃～37℃。
4.?必要的气体环境????主要是O2和CO2。
按细菌对O2的需要与否，将细菌分为：
细菌生长繁殖的规律
细菌的繁殖方式：无性二分裂。
细菌的繁殖速度：大多数细菌20～30分钟即可分裂一次。
2.细菌的营养类型和营养机制，自氧菌与异氧菌的概念。
3.细菌的生长曲线及其特点。
（一）能量代谢
细菌获取能量的途径——?生物氧化。
细菌能量代谢的主要类型：
（二）分解代谢
检测细菌糖分解产物的常用试验：糖发酵试验、甲基红试验、VP试验等。
检测细菌蛋白质和氨基酸分解产物的常用试验：吲哚（靛基质）试验、硫化氢试验、苯丙氨酸脱氨酶试验等。
其他检测细菌分解产物的常用试验：尿素分解试验、枸橼酸盐利用试验等。
第三节?细菌与环境
1正常菌群的概念和生理功能；条件致病菌的概念
2.正常菌群的生理功能；条件致病菌的概念
3.消毒、灭菌、无菌、无菌操作等概念；高温消毒灭菌法及其应用。
二、细菌的控制
（一）基本概念：消毒?杀死物体或介质中病原微生物的方法。灭菌?杀灭物体或介质中所有微生物的方法?。无菌?无活菌存在的状态。无菌操作?防止微生物进入机体或物体的操作技术。防腐?防止或抑制细菌生长繁殖的方法。
4.常用物理和化学消毒灭菌方法及其应用；噬菌体与宿主的相互关系。
第二章?真菌的基本性状
真菌的概念
真菌的分类真菌孢子与细菌芽胞的区别
第三章?病毒的基本性状
病毒的大小
病毒的结构
病毒的增殖
病毒的复制周期
第四章?微生物与感染
细菌致病三大因素
细菌内外毒素的区别
毒血症、菌血症、败血症、脓毒血症的概念
全身感染的类型
第二篇?微生物检验的基本技术
第五章?细菌的检验技术
第一节?细菌形态检验技术
细菌染色的一般程序
染色标本检查的一般程序
革兰氏染色法、抗酸染色法的原理、方法。
2.革兰染色法
第二节?细菌的接种与培养技术
调配—溶化—调Ph—过滤澄清—分装—灭菌—检定—保存
细菌在各种培养基上的生长现象及观察要点。
培养基的概念
培养基的分类
第三节?细菌的生化鉴定技术
糖(醇,苷)类发酵试验、O/F试验、MR试验、VP试验的原理、操作、结果判定要点及其应用；I试验、C试验、氧化酶、触酶、血浆凝固酶氢氧化钾拉丝试验及KIA和TSI的试验原理、操作要领、观察结果要点及其应用。
一、碳水化合物的代谢试验
1、糖（醇、苷）类发酵试验
原理：多糖→单糖→丙酮酸→酸性产物(或产气)
→pH↓→呈酸性变色(或出现气泡
2、?O/F试验
原理：根据细菌在分解葡萄糖的代谢过程中对氧分子需求的不同，将细菌分为氧化、发酵和产碱型三类?
3、甲基红试验
原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，进一步分解生成大量混合酸，使培养pH下降至4.4以下，加入甲基红后，呈现红色反应。为甲基红试验阳性。
4、V-P试验
原理：细菌分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中，乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰与胍基化合物结合，生成红色化合物，是为V-P试验阳性。
5、?β-半乳糖苷酶试验（ONPG）
原理：有的细菌可产生β-半乳糖苷酶，能分解邻硝基酚β-D半乳糖苷(ONPG)而生成黄色的邻硝基苯酚，该试验也称为ONPG试验。?
6、七叶苷水解试验
原理：某些细菌能分解七叶苷产生葡萄糖与七叶素，七叶素与培养基中的Fe2+结合后，形成黑色的化合物，使培养基变黑。?
二、蛋白质和氨基酸的代谢
2、硫化氢试验
原理：细菌产生酶，分解含硫氨基酸生成硫化氢，硫化氢与培养基中的亚铁盐或铅盐结合生成黑色化合物。
3、尿素酶试验
原理：细菌产生脲酶，水解尿素生成氨和二氧化碳，培养基呈碱性反应
4、苯丙氨酸脱氨酶试验
原理：细菌产生苯丙氨酸脱氨酶，使苯丙氨酸脱氨形成苯丙酮酸，苯丙酮酸与三氯化铁作用，形成绿色化合物
三、碳源利用试验
枸橼酸盐利用试验
原理：有的细菌能利用培养基中的枸橼酸盐作为唯一的碳源，细菌在生长过程中分解枸橼酸盐产生碳酸盐，使培养基呈碱性反应
四、酶类试验
1、氧化酶（细胞色素氧化酶）试验
原理：某些细菌具有氧化酶（细胞色素氧化酶），能将二甲基对苯二胺或四甲基对苯二胺氧化生成红色的醌类化合物
2、触酶试验
原理：细菌产生的触酶（过氧化氢酶）能催化过氧化氢放出初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。
3、凝固酶试验（试管法）
原理：金黄色葡萄球菌能产生凝固酶，使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白。?
4、凝固酶试验（玻片法）
原理：金黄色葡萄球菌能产生凝固酶，使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白
5、硝酸盐还原试验
原理：某些细菌能还原培养基中的硝酸盐为亚硝酸盐，亚硝酸盐与醋酸作用，生成亚硝酸，亚硝酸与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮磺酸，再与α-萘胺结合，生成N-α-萘胺偶氮苯磺酸(红色化合物
第六章?真菌检验技术
真菌感染性疾病的微生物学检查原则
第七章?病毒检验技术
病毒标本的采集和运送注意事项；
第八章?细菌对抗菌药物敏感试验
药物敏感试验的基本概念、常用方法
抗菌药物敏感试验方法?纸片扩散法稀释法E-test法
需氧菌及兼性厌氧菌的药物敏感试验（K-B法和稀释法的原理、方法、结果判断及正确发报告）。
第三篇?常见微生物鉴定技术
第十章?需氧和兼性厌氧球菌
葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、淋病奈瑟菌的主要形态特征、培养特性、分类依据及分类；病原性球菌标本采集种类、检验鉴定程序、鉴定要点、检验鉴定依据及报告要点。
第十一章?革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌
第一节肠杆菌科
概述
肠杆菌科细菌：1.G-杆菌，多数有鞭毛、菌毛
2.发酵葡萄糖，兼性厌氧
3.氧化酶阴性
4.还原硝酸盐为亚硝酸盐
5.触酶（＋）
肠道选择性培养基：麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂、SS琼脂等
肠杆菌科抗原：O抗原（菌体抗原），K抗原（荚膜抗原），H抗原（鞭毛抗原）等
肠杆菌科鉴定依据：?1.革兰染色
2.触媒、氧化酶、硝酸盐还原
3.KIA、MIU、IMViC,其他生化反应
4.血清玻片凝集（鉴定到种、型或血清型）
IMViC试验：吲哚（I）、甲基红（M）、VP（V）、枸橼酸盐利用（C）四种试验，常用于鉴定肠道杆菌。
二、埃希菌属
形态染色：?1.短杆菌
2.革兰染色阴性
3.有鞭毛
4.有菌毛
培养特性?：?符合肠杆菌特点
EMB——紫黑色有金属光泽乳糖发酵菌落
S-S——桃红色乳糖发酵菌落??
生化反应：??IMViC（++--）
大肠杆菌KIA：?AA＋－
血清型表示法：O：K：H?
ETEC肠毒素：耐热肠毒素（ST）
不耐热肠毒素（LT），65oC30min被破坏
引起腹泻的大肠埃希菌：肠产毒性大肠埃希菌ETEC
肠致病性大肠埃希菌EPEC
肠侵袭性大肠埃希菌EIEC
肠出血性大肠埃希菌EHEC
肠凝聚性大肠埃希菌EAEC
EIEC毒力测定试验：豚鼠眼结膜试验
卫生学标准：每ml饮水中细菌总数≤个，每0ml水中大肠杆菌菌群数≤3个，每ml?瓶装汽水、果汁中，大肠杆菌菌群数≤5?个。
三、沙门菌属
对人类有致病性：肠热症?；食物中毒；败血症
形态染色：G-杆菌?；周身鞭毛
培养和生化反应：不分解乳糖分解葡萄糖；分解蛋白质，产生H2S
伤寒沙门菌菌落特征（EMB、MAC）：无色透明菌落
伤寒沙门菌菌落特征（SS）：无色透明或半透明，中心黑色菌落
伤寒沙门菌KIA：?KA－＋
标本采取：第1-2W，血、骨髓；第2-3W，粪便、尿；全程取骨髓
肥达反应:?用已知伤寒沙门菌O、H和甲型副伤寒沙门菌和乙型副伤寒沙门菌H抗原与病人血清做定量凝集试验，用以辅助诊断肠热症。TO≥1：80，TH≥1：；PA、PB均≥1：80才有意义。动态观察：双份血清抗体四倍升高有诊断意义
四、志贺菌属
形态染色：符合肠杆菌特征，有菌毛，无鞭毛，无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区别点
培养特性：肠道鉴别培养基上的无色透明、乳糖不发酵菌落
抗原分类：根据O抗原分4群，40余型，我国常见B群
A群——痢疾志贺菌??B群——福氏志贺菌???
C群——鲍氏志贺菌??D群——宋氏志贺菌
培养和生化反应：不分解乳糖分解葡萄糖
菌落特征（EMB、MAC）：无色透明菌落
KIA：?KA－－
MIU：－－－
外毒素：A群（Ⅰ、Ⅱ型）产生志贺毒素（ST）有3种生物活性
1.肠毒素：类似ETEC毒素、霍乱肠毒素作用——水样泻
2.细胞毒性：对人肝细胞、肠黏膜细胞有毒性，引起变性坏死
3.神经毒性：损伤动物神经系统（麻痹、死亡）
快速诊断：荧光菌球试验；协同凝集试验
六、变形杆菌属
形态染色：有周鞭毛
培养特性：扩散生长，有迁徙生长现象。在培养基中（含5％琼脂）加入0.1％石炭酸则形成单个菌落；肠道选择性培养基上形成无色透明菌落
变形杆菌KIA：?KA++?
MIU：?++/-+
八、耶尔森菌属
历史：三次世界性大流行，是我国重点监控的自然疫源性传染病。
形态染色：G—球杆菌，两极浓染
培养特性：普通培养基，生长缓慢，24-48h，?R型“破草帽”状菌落
菌落特征（EMB、MAC）：无色透明菌落
甲类烈性传染病：鼠疫（黑死病）
常见临床类型：腺鼠疫、败血型鼠疫、肺鼠疫
标本采集：临床标本（淋巴结穿刺液、血液或痰标本）；非临床标本（尸检取病变组织，鼠标本应严格消毒体表，再进行采集）??
第二节?弧菌科
一群菌体短小、弯曲成弧形或直杆状的革兰阴性细菌；具有一端单一鞭毛、运动迅速；弧菌科细菌广泛分布于自然界，以水中最为多见
弧菌属
（一）霍乱弧菌
霍乱弧菌的疫源地：印度恒河三角洲（O1群，古典生物型）；印尼苏拉威西岛（O1群，埃托生物型）；孟加拉湾（O群）
已发生七次世界性的霍乱大流行：均由霍乱弧菌的O1群引起，前六次为霍乱弧菌的古典生物型，第七次为埃尔托生物型
形态：新从患者标本中分离出的细菌革兰染色阴性，弧形或逗点状；在患者“米泔水”样便中，可呈头尾相接的“鱼群”样排列；菌体一端有鞭毛，悬滴观察时呈“穿梭”样运动
培养特性：营养要求不高，故用Ph8.4-9.2碱性培养基；分离（选择）能在无盐培养基中生长（区别其它弧菌）；在pH8.5的碱性胨水中经35℃4~6h增菌后可在液体表面大量繁殖形成菌膜
抵抗力：较弱；水源性传播，水性爆发；怕酸，正常胃酸4min
霍乱肠毒素（CT）：最强烈的致泻毒素
吐泻期：剧烈吐泻、米泔样
免疫力：病人愈后可获得牢固免疫
O1群霍乱弧菌的O抗原：由A、B、C三种抗原因子组成；通过不同组合可形成三个型别：由AB组成小川型、AC组成稻叶型、ABC组成彦岛型
常用的选择性培养基：
1.硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖?(TCBS)琼脂平板：霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色
2.4号琼脂、庆大霉素琼脂：生长并将培养基中的碲离子还原成元素碲,形成灰褐色菌落中心
3.能在无盐培养基上生长
古典生物型和埃尔托生物型的区别试验：羊红细胞溶血；鸡红细胞凝集；V-P?试验；多粘菌素B敏感试验；Ⅳ组噬菌体裂解；Ⅴ组噬菌体裂解
标本采集和运送：在发病早期，尽量在使用抗菌药物之前采集标本；取患者“米泔水”样便，亦可采取呕吐物或尸体肠内容物，或采取肛门拭子；标本应避免接触消毒液；采取的标本最好就地接种碱性胨水增菌；不能及时接种者可用棉签挑取标本或将肛门拭子直接插入卡－布运送培养基中
动力和制动试验：直接取“米泔水”样便，制成悬滴(或压滴)标本后，在暗视野或相差显微镜下直接观察呈穿梭样运动的细菌；同法重新制备另一标本涂片，在悬液中加入1滴不含防腐剂的霍乱多价诊断血清(效价≥1：64)，可见最初呈穿梭状运动的细菌停止运动并发生凝集，则为制动试验阳性
快速诊断：将标本接种于含有霍乱弧菌荧光抗体的碱性蛋白胨水中，经37℃4～6h，如有霍乱弧菌，在荧光显微镜下可见发荧光的菌球。本法适用于做大量标本的初筛
SPA协同凝集试验：以霍乱弧菌IgG型抗体与SPA阳性葡萄球菌结合作为试剂，与米泔水样便或增菌液作玻片凝集，立即出现明显凝集者（＋＋＋）为阳性
粘丝试验：将0.5％去氧胆酸钠水溶液于霍乱弧菌混匀制成浓厚菌液，1min内悬液由混变清，并变得粘稠，以接种环挑取时可以拉出丝来
（二）副溶血性弧菌
具有嗜盐性
形态：革兰阴性杆菌，有鞭毛（极单毛）
培养特性：在无盐培养基上不能生长，最适合生长的氯化钠浓度为3.5%，超过8%不能生长
TCBS琼脂平板:蔗糖不发酵而呈蓝绿色菌落
第三节?非发酵革兰阴性杆菌
非发酵革兰阴性杆菌：一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌
一、?假单胞菌属
铜绿假单胞菌
所致疾病：条件致病菌；医院感染的重要病原菌；大面积烧伤创面感染的重要病原菌
生物学特性：革兰阴性，长短不一，单鞭毛，氧化酶阳性
生长温度：25～42℃
分离培养与鉴定：1.血平板上毛玻璃样，金属光泽，生姜味
2.可产生多种色素：荧光素与绿脓素
血琼脂平板：透明溶血环
O/F试验：氧化型
第四节?其他革兰阴性苛氧菌
一、嗜血杆菌属
流感嗜血杆菌
所致疾病：原发化脓性感染及继发性感染，包括脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎、鼻窦炎及中耳炎等
生物学特性：革兰阴性短小球杆菌
分离培养：需要X、V因子；营养要求高，血琼脂平板培养基，巧克力琼脂培养基
菌落特征：巧克力琼脂培养基,小、无色透明菌落
卫星现象：当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培养时，靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较大，远离葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较小
四、布鲁菌属
传染源：病兽，以羊、牛、猪多见
传播途径：病兽的组织、尿、乳液等通过人体的皮肤、呼吸道、消化道进入人体
易感人群：发病以青壮年为主，从事兽医、皮毛加工、屠宰的工人发病率较高
临床表现：长期发热、多汗；关节疼痛及全身乏力、疼痛
微生物特性：革兰阴性短小球杆菌
培养特性：需氧菌，营养要求较高；生长缓慢（5~7天）
第十二章?革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌
革兰阳性无芽胞杆菌
白喉棒状杆菌
形态与染色:?G+细长微弯的杆菌；一端或两端膨大呈棒状；常排列呈V、L、X等文字形；异染颗粒——形态上的鉴别特征
培养特性：营养要求高，吕氏血清斜面或鸡蛋斜面
亚碲酸钾BAP：选择鉴别培养基，黑色菌落——鉴别依据
毒力试验：1.体外法：琼脂平板毒力试验（Elek平板毒力测定）；SPA协同凝集试验；对流电泳
2.体内法：用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验
第二节?革兰阳性需氧芽胞杆菌属
炭疽芽胞杆菌
临床意义：炭疽是人兽共患的急性传染病，皮肤炭疽、肠炭疽、肺炭疽等
炭疽毒素：保护性抗原、致死因子、水肿因子
传染源：患病食草动物及其制品或被污染物
传播途径：1.接触——皮肤炭疽
2.食用——肠炭疽
3.吸入——肺炭疽
形态染色:致病菌中最大的G+杆菌；两端平切、竹节状；有毒株可有明显荚膜
芽胞：1.椭圆形，小于菌体，位于菌体中央
2.多在有氧条件下形成，25～30℃，在培养基中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中，都易形成芽胞
3.在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞，尸体严禁解剖
培养特性：1.普通培养基上卷发状菌落
2.BAP：12～15h不溶血，18～24h轻微溶血
3.肉汤：絮状沉淀生长
4.明胶：37℃18～24h表面液化成漏斗状，由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状。
5.NaHCO3BAP：有毒株--黏液型菌落，挑取时呈粘丝状(鉴别要点)
无毒株—粗糙型菌落
抗原构造：1.?菌体多糖抗原：与毒力无关，耐热、耐腐败，长时间煮沸仍能与特异性抗体发生环状沉淀反应（Ascoli热沉淀反应），特异性不高，可作追溯性诊断
2.荚膜多肽抗原：荚膜肿胀试验，对本菌鉴定有意义
标本的采集与处理:?死于败血症的动物，严禁宰杀和解剖，可消毒皮肤后割取耳朵、舌尖采集少量血液
串珠试验:炭疽芽胞杆菌在每毫升含有0.05-0.5U青霉素的培养基中，可发生形态变异，形成大而均匀的圆球状并相连如串珠状
第十三章?分枝杆菌属
分枝杆菌是一类细长略带弯曲的杆菌，含有分枝菌酸，有分枝生长的趋势而得名。具有抗酸性，故又称抗酸杆菌。
结核分枝杆菌
所致疾病：通过呼吸道、消化道和损伤的皮肤等多途径感染机体，引起多种脏器的结核病，其中以肺结核为多见
致病物质：荚膜、脂质和蛋白质等菌体成分
免疫性：有菌免疫或称传染性免疫，细胞免疫在抗感染免疫中起重要作用
微生物特性：1.分枝状，略带弯曲的抗酸杆菌，抗酸性染色法染色后结核分枝杆菌呈红色，背景呈蓝色
2.专性需氧，营养要求较高，最适生长温度为35℃，生长缓慢,2~5w才出现肉眼可见的如菜花样粗糙型菌落。
结核菌素试验：纯蛋白衍生物(PPD)，注入皮内后如受试者已感染结核，则结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，形成迟发型超敏反应性炎症
机体抗结核免疫特点：传染、免疫、超敏反应共存
第十四章?厌氧性细菌
破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌的形态特征、培养特性；
厌氧性细菌的检验鉴定要点和报告方式。
第十五章?螺旋体、支原体、衣原体、立克次体
第一节?螺旋体
螺旋体：是一种细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物
钩端螺旋体
所致疾病：钩端螺旋体病
传染源与储存宿主:自然疫源性疾病，鼠类和猪为主要储存宿主
传播途径：间接接触传播（接触被含菌尿液污染的水源）、血液传播、垂直传播????????????
生物学特性：1.螺旋一端或两端呈钩状
2.有两根周浆鞭毛，运动活泼
3.?G-，但不易着色，镀银染色成棕褐色
梅毒螺旋体
所致疾病：梅毒
1.先天性：母体通过胎盘传给胎儿
2.获得性：性传播
获得性梅毒临床分期：分为三期
1.Ⅰ期（初期）梅毒：感染后3周左右局部出现无痛性硬下疳，感染性极强。
2.Ⅱ期梅毒：发生于硬下疳出现后2~8周，全身皮肤、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大
3.Ⅲ期（晚期）梅毒：发生感染2年后，病变可波及全身组织和器官；基本损害为慢性肉芽肿；病损内螺旋体少但破坏性大
生物学特性：G-，但不易着色，镀银染色呈棕褐色；对青霉素、四环素、红霉素等抗生素敏感
微生物学检查：标本：Ⅰ、Ⅱ期梅毒取下疳渗出液、梅毒疹渗液或淋巴结穿刺液；先天性梅毒取脐血
第二节?支原体
支原体：是一类没有细胞壁，形态上呈多样性，可通过细菌滤器，能在无生命培养基中生长的最小的原核细胞型微生物；因其生长后能形成分枝长丝，故命名为支原体；G-，但不易着色，Giemsa染色呈淡紫色；油煎蛋样的菌落
所致疾病：支原体肺炎????
冷凝集实验:肺炎支原体感染后，患者血清中出现冷凝集素，能在0-4?℃条件下凝集人红细胞（37℃时却无此效应）。此凝集实验为非特异性的，是肺炎支原体感染的辅助诊断试验
衣原体：是一类专性活细胞内寄生、具有独特发育周期、且能通过细菌滤器的、介于立克次体与病毒之间的原核细胞型微生物
首先成功分离鉴定出沙眼衣原体：我国学者汤飞凡于年
能引起人类疾病的衣原体：主要有沙眼衣原体和肺炎衣原体
立克次体：是一类专性活细胞内寄生的G-原核细胞型微生物，是引起斑疹伤寒、恙虫病、Q热等传染病的病原体；与节肢动物关系密切，大多是人畜共患病的病原体
Weil-Felix?反应（外斐反应）：大部分立克次体与普通变形杆菌某些菌株（X19、Xk、X2）的菌体抗原有共同的抗原成分，故可用这些变形杆菌的菌体抗原与不同稀释度的患者血清做凝集反应，诊断立克次体病。
第十六章?常见真菌
1.真菌的概念、生物学性状；真菌感染性疾病的微生物学检查原则；皮肤癣真菌、白假丝酵母菌、新生隐球菌的形态特征及微生物学检验。
2.真菌感染性疾病的微生物学检查原则；皮肤癣真菌、白假丝酵母菌、新生隐球菌的形态特征及微生物学检验。
第十七章?常见病毒
第一节?呼吸道病毒
1.正粘病毒(流感病毒)的结构、型别、抗原变异与流行的关系；微生物学检验。
2.正粘病毒(流感病毒)的型别、抗原变异与流行的关系。
第二节?肝炎病毒
1.HAV、HBV、HCV、HDV、HEV五型肝炎病毒的生物学特性，微生物学检验。
2.乙肝五项的结果分析及临床意义
第三节?逆转录病毒
1.HIV的生物学特性、致病性、免疫性与防治原则。HIV的微生物学检验。
2.HIV的生物学特性。
第四节?其他病毒
1.流行性乙型脑炎病毒、出血热病毒、狂犬病毒、疱疹病毒、人乳头瘤病毒的生物学特性及致病性。以上病毒的微生物学检验。
2.流行性乙型脑炎病毒、出血热病毒、狂犬病毒、疱疹病毒、人乳头瘤病毒的生物学特性及致病性。
第五节?肠道病毒
1.肠道病毒的共性，种类。
2.脊髓灰质炎病毒的生物学特性，致病性与微生物学检验。
第十八章?临床常见标本的细菌学检验
1.临床常见标本采集及运送、检验程序、报告方式、血液标本的细菌学检验、痰液标本的细菌学检验、脑脊液标本的细菌学检验。
2.粪便标本的细菌学检验、尿液标本的细菌学检验、脓标本的细菌学检验。
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